DIAGNOSTICO MOLECULAR DE LAS INFECCIONES CON VPH Y VIH
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Dra. Carla Santana Torres y Dr. Gino Noris García
En las pasadas décadas se desarrollaron, en los laboratorios de investigación científica, metodologías especialmente poderosas para el estudio del material genético de los seres vivos; hoy en día estas metodologías se trasladan a los laboratorios clínicos para ser utilizadas en un mejor diagnóstico de una gran gama de enfermedades tanto genéticas como infecciosas, y actualmente se le denomina Diagnóstico Molecular.
Lo anterior ha acarreado un mejor manejo de las enfermedades con el consiguiente beneficio para los pacientes, los cuales gracias a esto pueden tener un menor tiempo de hospitalización y un mejor pronóstico de recuperación de la enfermedad.
Recientemente el desarrollo de la tecnología de amplificación de ácidos nucleicos ha tenido un impacto significativo en el diagnóstico y manejo de muchas enfermedades infecciosas, sobre todo en enfermedades producidas por microorganismos de lento crecimiento, tales como Chlamydia, micoplasmas, micobacterias, etc., o por patógenos que no pueden ser cultivados como los virus del herpes, de la hepatitis, del papiloma humano (VPH) y el citomegalovirus. También han sido de gran utilidad para lograr un mejor pronóstico de vida de los pacientes infectados por el Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH) o el de la hepatitis C al desarrollarse ensayos de PCR para la medición de la concentración de estos virus (Carga Viral) en la sangre.
El diagnóstico molecular de la infección con VPH es de suma importancia, debido a la alta prevalencia de la infección, se tienen datos epidemiológicos que indican que en México hay una prevalencia de hasta el 20% en mujeres que presentan citologías normales. Además es importante recalcar que existen más de 40 tipos de VPH que infectan el tracto ano-genital, sin embargo de estos sólo los VPH de alto riesgo son los agentes etiológicos del cáncer cervicouterino, por lo que es importante no solo hacer la detección, si no además tipificar al VPH presente para poder ofrecer un diagnóstico de relevancia clínica para la paciente. Actualmente se cuentan en el mercado con diversas metodologías estandarizadas y aprobadas para su uso diagnóstico que permiten detectar y en algunos casos tipificar los VPH de alto riesgo, como es la captura de híbridos, el PCR seguido de: un revelado enzimatico, una secuenciación o bien un blot reverso; o bien el PCR multiplex. Cada técnica tiene sus ventajas y desventajas, las cuales son importantes tomar en cuantao para poder elegir la técnica más apropiada según el caso a tratar. Es importante entonces que, más que casarse con un solo método, se pueda tener en el laboratorio la versatilidad necesaria para ofrecerle al médico el estudio que sea más adecuado para su paciente.
Por otro lado, el diagnóstico molecular de la infección con VIH ha sido de gran importancia para el tratamiento y seguimiento de los pacientes VIH positivos. Históricamente, el avance en el desarrollo del diagnóstico molecular se debe primordialmente a la aparición de la infección con VIH y del desarrollo de terapias antiretrovirales que han permitido un mejor pronóstico de vida para estos pacientes. Conforme se han desarrollado mejores antiretrovirales que permiten controlar en gran medida la replicación del virus en el organismo, se ha generado la necesidad de contar con mejores técnicas moleculares que permitan medir el número de partículas virales en la sangre y que sean lo más sensibles posibles para permitir evaluar eficazmente el éxito del tratamiento en lograr la disminución de la replicación del virus. Por ley en nuestro país se deben de hacer por lo menos dos cargas virales al año a los pacientes que viven con VIH y que se encuentran en tratamiento antiretroviral, para poder monitorear la eficacia del mismo y detectar a tiempo si es necesario cambiar el esquema del tratamiento. Un buen control de la replicación viral permite por un lado disminuir la probabilidad de mutaciones en el virus que lo vuelvan resistente a los medicamentos y por el otro un menor deterioro del sistema inmune del paciente aumentando su pronóstico de vida y evitando o retardando la aparición de la enfermedad, el SIDA. Es por ello que el diagnóstico molecular en estos pacientes juega un papel fundamental, y existen en el mercado diversas técnicas moleculares que permiten medir la carga viral con una alta sensibilidad, la prueba más usada en México es la PCR punto final con controles de concentración conocida que permiten calcular la carga viral. Sin embargo desde hace tiempo este método ha sido sustituido en Europa y Estados Unidos por la utilización del PCR en tiempo real que es más exacta y más sensible, en México apenas se esta introduciendo pero a costos muy elevados.
Es importante recalcar que, es indispensable que en nuestro país se realice con mayor frecuencia la genotipifiación viral, tanto en pacientes recien infectados como en aquellos que han presentado falla a los esquemas antiretrovirales, ya que con esta técnica molecular se puede determinar rápidamente a que medicamentos es resistente el virus presente en el paciente. Lo cual permite poderle dar el mejor tratamiento, o bien evitar que se indiquen esquemas antiretrovirales ineficientes y que por ensayo y error, que ocurre muchas veces en el tratamiento de estos pacientes, aumente la probabilidad en el mismo de desarrollar la enfermedad, al no lograr una disminución eficaz en la replicación del virus y por tanto la generación de mutaciones que lo vuelven resistente al medicamento. A medida que estas técnicas sean más utilizadas como coadyuvantes en el diagnóstico del paciente, los costos de las mismas irán disminuyendo como ha ocurrido en otros países, y el costo beneficio será mucho mayor al reducir el gasto en medicamentos que resultan actualmente obsoletos en muchos de los pacientes que viven con VIH.
