Blog Biologia Molecular Diagnostica / » Prueba Molecular de detección del Virus de la Influenza A H1N1 (2009)

Dra. Carla Santana y Dr. Gino Noris. BIMODI Biología Molecular Diagnóstica.

La Influenza A H1N1 es una enfermedad febril respiratoria con síntomas similares a los de la infección con el virus de la influenza estacional: fiebre, tos, dolor de cabeza, molestia en garganta, rinorrea, dolor de músculos y en algunos casos diarrea y vómito.  La infección resulta ser auto-limitante y sin complicaciones graves, pero existen casos que presentan una enfermedad respiratoria severa causando incluso la muerte.

Imagen tridimensional por computadora del virus de la Influenza.

El brote de influenza que se vive actualmente es causado por un nuevo subtipo del virus de la Influenza A denominado H1N1 (2009) que fue identificado el pasado abril. Este virus se ha diseminado rápidamente por todo el mundo causando una epidemia a nivel mundial siendo ahora la cepa de Influenza predominante. Los datos reportados por la Secretaría de Salud al 19 de octubre, confirman un total de 45,800 casos de infecciones por esta cepa con 271 defunciones en México, mientras que la OMS tiene aprox. 400,000 casos de infecciones con aprox. 4,700 muertes. Debido al comportamiento de este virus, a la forma tan rápida en que se disemina, a que la mayoría de los casos son autolimitantes y a que la OMS ya no solicita reportes diarios de todos los casos en cada país, es muy probable que los casos reportados sean menores que los reales.

Existen cuatro medicamentos antivirales para el tratamiento de la influenza: amantadina, rimantadina, oseltamivir y zanamivir. El análisis del virus de la Influenza A H1N1 (2009) indica que es resistente a la amantadina y a la rimantadina. Por lo que  los medicamentos que permiten el tratamiento son el oseltamivir (nombre comercial Tamiflu®) y el zanamivir (nombre comercial Relenza®). Ambos evitan que los virus se reproduzcan en el cuerpo, provocando que la enfermedad sea más leve y la recuperación más rápida. Su uso está controlado por lo que deben ser prescritos por un médico.

Todos los virus de la influenza cambian de manera constante, por lo que, para protegernos contra las nuevas variantes, cada año se generan nuevas vacunas para la influenza estacional. El nuevo virus H1N1 (2009) es diferente al virus de influenza A que anteriormente infectaba a los seres humanos, por lo que las vacunas de la influenza estacional no brindan protección contra este nuevo virus; afortunadamente, la capacidad para generar una vacuna contra este nuevo virus está altamente desarrollada.

En Querétaro el laboratorio BIMODI (especializado en Diagnóstico Molecular) realiza el estudio de PCR para la detección y tipificación del Virus de la Influenza A H1N1 (2009).  El resultado consta de dos partes: uno que indica si se ha detectado cualquier tipo de virus de la influenza A y el segundo si se trata del subtipo H1N1 (2009).

Para diagnosticar una infección por Influenza A H1N1 (2009), se debe recolectar una muestra de secreción respiratoria en los primeros 4 a 5 días de aparición de la enfermedad, el estudio no puede realizarse en una muestra de sangre.

Existen varias pruebas para el diagnóstico de la influenza en especímenes respiratorios, estas incluyen: Las pruebas rápidas que detectan directamente a los antígenos, el aislamiento de virus en cultivo y la detección molecular de ARN específico del virus de la influenza mediante Transcripción Reversa y Reacción en Cadena de la Polimerasa en tiempo real (rRT-PCR).

Las pruebas difieren en su sensibilidad y especificidad para detectar los distintos virus de la influenza, en su disponibilidad comercial, en el tiempo transcurrido desde la toma de muestra hasta la obtención del resultado, en su estatus de aprobación por las autoridades y en su habilidad para distinguir entre los diferentes virus de influenza (tipo A o B) y distintos subtipos de influenza A (por ejemplo virus H1N1 (2009) versus virus H1N1 estacional o H3N2 estacional).

En este momento, la forma más adecuada para realizar la detección del virus de la influenza H1N1 2009 es mediante la búsqueda del material genético del virus, utilizando la técnica molecular antes mencionada. No todos los ensayos por amplificación de ácidos nucleicos pueden diferenciar específicamente al virus de la influenza A H1N1 2009 de otros virus de la influenza A. Si se requiere determinar si una infección se debe al virus A H1N1 debe de realizarse una prueba específicamente diseñada para este objetivo. Existen varios ensayos moleculares, comerciales o generados por la academia, para el diagnóstico de influenza A H1N1.  La Secretaria de Salud actualmente está diagnosticando por medio de estas técnicas y varios laboratorios estatales han sido equipados para realizar estos estudios. Lo que suelen buscar estos estudios es identificar si la infección se debe a un virus de la influenza tipo A y específicamente si se trata de un virus A H1N1 2009, así que por lo general el análisis consta de dos partes o dos identificaciones, una que arroja un resultado sobre los virus de la influenza tipo A y otro que discierne si se trata específicamente del subtipo A H1N1 2009.

Las pruebas rápidas que suelen detectar los antígenos (proteínas) del virus son muy poco sensibles para esta nueva cepa H1N1 2009 (sensibilidad promedio del 60%) por lo que al usarlas se corre un alto riesgo de obtener resultados falsos negativos. Esto significa que un resultado negativo de una prueba rápida no excluye una infección por virus de la influenza, ya que en el mejor de los casos (70% de sensibilidad) 3 de cada 10 pacientes que verdaderamente están infectados por el virus, no obstante, tendrán un resultado negativo. Además no pueden distinguir si se trata de la Influenza A estacional o  del nuevo virus H1N1 (2009). Dado todo lo anterior, sería prudente que los laboratorios que realizan pruebas rápidas pusieran alguna nota en sus reportes acerca de las limitaciones de la prueba, de manera que los médicos puedan tomar mejores decisiones  en el manejo de los pacientes.

Esta pandemia es un proceso de la naturaleza que ya ha sucedido con anterioridad, el ejemplo más dramático es la epidemia de influenza que inició en España en 1918 y que mató a 50 millones de personas, estos fenómenos son cíclicos por lo que seguirán sucediendo en el futuro.

Es indispensable que todos sigamos aplicando las medidas sanitarias necesarias para reducir al máximo los contagios y acudir al médico ante cualquier síntoma que haga sospechar de una infección con este virus.

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